青霉素过敏试验是预防青霉素过敏反应的一项有效措施，过敏试验的方法有眼结膜囊内滴入法、皮肤划痕法和皮内注射法等，以皮内注射法最为常用。做青霉素过敏试验时有几个问题需加以注意。
1、关于皮试液中青霉素的含量：皮试液中青霉素的含量要求每毫升含青霉素G100～1000单位，试验时皮内注射0.1毫升含青霉素G10～100单位。有人用不经稀释或不按正规操作稀释的青霉素进行皮试，是非常危险的。
如果20万单位的青霉素G用2毫升注射用水溶解后，每毫升含10万单位，再将此液0.1毫升(含1万单位)溶于10毫升生理盐水中，即配成每毫升含1，000单位的皮试液。皮试液配出后必须当天使用，放置过久由于青霉素水解破坏而失效。关于青霉素皮试液的稀释，各地可根据具体情况进行配制。
2、关于不同青霉素制剂的皮试问题：由于各种青霉素间存在着交叉过敏性，对一种青霉素制剂过敏，对其他青霉素也过敏，所以在用任何一种青霉素（如青霉素G、普鲁卡因青霉素、长效西林、新型青霉素）都需做过敏试验，并使用一种皮试液即可。
3、注射过青霉素而再需注射，隔多少天后必须重做皮试?以前注射过青霉素没有发生过敏反应的病人，并不是以后再用青霉素永远不发生过敏反应了，因此隔一段时间再次用药就要重做皮试。一般认为，两次使用青霉素之间如果相隔三天以上，就以重做皮试为好，各地掌握仍不统一，大多数规定3～7天。
4、皮试后的即发反应和迟发反应问题：青霉素皮试阳性的人，一般在15～20分钟内局部出现反应，这种反应叫即发反应，出现即发反应的人注射青霉素后容易发生过敏性休克。有的人在皮试后24～48小时才表现局部反应，叫迟发反应，出现迟发反应的人注射青霉素后容易发生一般过敏反应。所以对于青霉素皮试阴性的人，并不意味着对青霉素不会出现过敏反应了，用药过程中都要仔细和严密观察。
5、青霉素过敏试验的眼结膜囊内滴入法：本试验方法的准确率比皮内注射法为低，并且有时造成强烈的局部反应，对病人危害性较大，所以一般不提倡采用这种方法进行过敏试验。
